水处理采样准备

　　取样器材：两支50mL注射器(配合膜过滤法/滤膜法结果精度可以达到1cfu/50mL=0.02cfu/mL)棉签一包

　　75%酒精一瓶（检查有效期及开封日期）

　　戴口罩，一次性手套

　　取样的核心：

　　1、取到的反渗水样本跟管道里正常流动的反渗水一致，不能受到污染，同样也不要有额外的消毒（残留酒精）；2、取样口处，透析用水从反渗水管道内部到进入采样器皿的过程保持无菌（酒精消毒）或不影响检测结果的反渗水管道内壁环境（流动反渗水冲洗30秒）。采样标准操作：1.采样口内部利用管路反渗水冲洗30秒；2.采样口外部酒精消毒两次待干；3.即可采样，采样时采样的器皿不能接触采样口。因为我们取样口无法开到较大流量冲洗，会弄得到处都是水，所以为了降低干扰，我院采样：1.采样口内部利用管路反渗水冲洗30秒；2.采样口内外均用酒精消毒两次待干；3.再次利用管路反渗水冲洗采样口内部30秒；4.采样时采样的器皿不能接触采样口。另:（2019版SOP征求意见稿）要求冲洗60秒，并75%酒精消毒外表面3次后待干取样。透析液采样：取样的核心：1、取样得到的透析液，必须与正常工作时进入透析器的透析液完全一样，不能有污染或者额外的消毒；2、从透析液供给管快速接头密封圈之下的位置，随着每次涌出透析液时采样，保证采到的透析液是管路里新涌出的，未经过密封圈等污染源（因为实际工作时，透析液也不经过密封圈）；3、当需要大量取样时，难以从透析液供给管快速接头取够样品，可以考虑利用透析器的无菌环境，从透析器透析液出口端采样。采样部位：1.透析液即将进入透析器的快速接头处（标准认可的取样部位）2.安装上无菌的一次性透析器，从透析器的透析液出口端取样（大量取样时可考虑）注意：机器自带机械取样口严禁进行微生物相关的取样，某些透析机管路上可以重复使用的类似给病人输药的取样口也不建议进行微生物相关取样。采样方法：1、透析液即将进入透析器的快速接头处

　　机器自检完毕且管路预充完毕，膜内膜外均已排气完成，病人上机前；

　　关闭透析液开关，从透析器上取下透析液供给管的快速接头；

　　保持快速接头开口向上，打开透析液开关，让透析液自然流出；

　　在透析液涌出的时间，将取样吸管或注射器插入快速接头底部取样；

　　在透析液涌出的时间，进行取样。

　　注意：取样部位必须在快速接头底部，同时采样过程不能碰到密封圈。我们50mL注射器还是从透析器即将进入透析液的快速接头处慢慢抽取的，但如果取几百毫升或者几升透析液，因为用时过长，透析机会检测到透析液通路不正常而发出各种警报，导致无法顺利取样。2、在难以按照第一种方法取样时，可以考虑第二种取样方法（专家共识但未列入标准）安装上无菌的一次性透析器，从透析器的透析液出口端取样。

　　主要流程跟第一种相同，区别在于取样位置；

　　透析器膜外排气完成后，病人上机前，关闭透析液开关，取下透析器透析液出口的快速接头；

　　将透析器倾斜45度打开透析液开关让透析液自然流出；

　　用已灭菌容器收集透析液。注意容器不能碰触透析器的透析液出口处。

　　培养基要求:透析用水和透析液进行细菌培养，使用膜过滤法进行培养（与内镜采样的滤膜法基本相同），培养基宜选用胰化蛋白胨葡萄糖培养基（TGEA）、R2A营养琼脂培养基（R2A），或其他确认能提供相同结果的培养基，不能使用血琼脂培养基和巧克力琼脂培养基。